产品描述

2×Hieff^® HotStart PCR Genotyping Master Mix (With Dye)是即用型的PCR预混合溶液，含有Hieff^® HotStart Taq DNA Polymerase，dNTP以及优化的缓冲体系，只需加入引物和模板即可进行扩增，大大简化了实验的操作步骤，可以高通量操作并提高实验结果的重现性。Hieff^® HotStart Taq DNA Polymerase是经过配体修饰的热稳定 Taq DNA Polymerase，该配体可以随温度变化来调节 DNA 聚合酶活性。在室温下酶活性被完全封闭，经95°C加热后活性才被释放。Hieff^® HotStart DNA Polymerase 的激活时间只需要 2-3 min，兼容现有的 PCR 程序。本产品防止了在样品准备及反应升温阶段产生非特异扩增，可以有效地进行基因分型实验。

产品应用

本产品主要应用于小鼠基因型鉴定。

质量控制

核酸外切酶残留检测：20 μL本品和0.6 μg λDNA -HindIII，37°C下孵育4 h，DNA的电泳谱带无变化。

核酸内切酶残留检测：20 μL本品和1 μg λDNA，37°C温育4 h，DNA的电泳谱带无变化。

大肠杆菌残留DNA检测: 50 μL体系中，加入25 μL本品，以无菌ddH2O为模板，扩增E.coil 16s rDNA 基因。30个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，无扩增条带。

运输与保存方法

冰袋运输。-20°C保存，有效期2年。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！

PCR反应体系（50 μL）

【注】：针对不同模板的最佳反应浓度有所不同，下表为50 μL反应体系推荐模板使用量，仅供参考。

PCR扩增程序

【注】：

1）退火温度和时间：退火温度推荐使用50-60°C。退火时间推荐设置为30 sec，可以在20-30 sec内调节。可根据需要，设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度和时间。
2）延伸温度和时间：温度推荐使用72°C。时间推荐使用30-60 sec/kb。
3）扩增产物：请将PCR扩增产物放置于-20°C保存，防止DNA发生降解。

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